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iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）

iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantitation）技術是一種多肽體外標記技術。該技術采用4-plex或8-plex同位素的標簽，通過特異性標記多肽的氨基基團，進行LC-MS/MS分析，可同時比較多種不同樣本中蛋白質的相對表達含量。??????????????
技術原理
應用領域
技術優勢

  • 各種脅迫、生理、病理條件下細胞、組織樣品中高通量蛋白表達譜分析
  • 各種物種的蛋白質組草圖的構建

實驗流程??

  • iTRAQ 可于一次實驗中同時標記 4 至 8 個的樣品，操作簡單快速，減少多次質譜檢測中產生的系統誤差。適用于對多個樣品進行高通量的檢測，實驗設計更加靈活。
  • iTRAQ 是在肽段水平上進行的體外標記，幾乎適用于所有類型的生物樣本。
  • 重現性好、靈敏度高、定性與定量可同時進行。
  • 檢測限低，可檢測出低豐度蛋白。

iTRAQ試劑包括3個部分：報告基團（report group）、平衡基團（balance group）和肽反應基團（amine-specific reactive group）。報告基團相對分子質量為113-121Da(無120)，因此iTRAQ 試劑可同時標記8 組樣品。平衡基團相對分子質量為192-184Da(無185)，使得八種iTRAQ試劑分子量均為305Da，保證標記的同一肽段m/z 相同。 肽反應基團將iTRAQ試劑與肽段上賴氨酸及N端氨基酸殘基相連，在其上報告基團通過平衡基團與反應基團相連，形成等量異位標簽。

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